[00988283]全细胞荧光原位杂交法快速检测B群链球菌及其在产前筛查中的应用

(1)任务来源：该项目于2005年获湖北省科技厅的项目基金资助(湖北省科技攻关项目)，项目编号为2005AA301C20。(2)所属技术领域和技术原理：该项目建立的全细胞荧光原位杂交法可快速、特异和敏感地筛查孕妇阴道样本中的GBS，属于临床诊断学/产前筛查/临床微生物领域。该项目主要是基于细菌遗传学原理，以16SrRNA为靶序列，针对GBS设计特异性寡核苷酸探针，采用全细胞荧光原位杂交技术直接检测标本中的GBS。(3)主要内容及特点：该项目以女性生殖道拭子为标本，设计B群链球菌特异性寡核苷酸探针，应用全细胞荧光原位杂交检测技术，可快速、特异、准确地检测GBS。该方法具有操作简单、耗时短、成本低廉、检出率高、结果可靠、重复性好、特异性和敏感性高、安全无放射性、可检测已死亡GBS等特点。课题组采用该方法对武汉地区孕妇标本进行检测，并以CDC推荐的常规培养方法作为对照，结果显示：全细胞荧光原位杂交法敏感性和阴性预测值均分别为93%和98.5%，均较培养法高。提示该方法具有较高的实用推广价值；同时，该课题结果还显示武汉地区孕妇GBS感染率高达17.5%，提示GBS感染问题亟需相关临床科室重视。(4)创新型：该研究建立的全细胞荧光原位杂交法可快速、特异和敏感地筛查孕妇阴道样本中的GBS，可为围产期胎儿及新生儿GBS感染提供更有效的诊断方法进而及早进行预防和干预，最终可降低新生儿的GBS发病率和死亡率。该课题首次将全细胞荧光原位杂交法应用于临床标本检测，并对武汉地区孕妇GBS携带状况进行了研究，具有以下特点：a)依据细菌遗传学原理，以16srRNA为靶序列，针对GBS设计特异性寡核苷酸探针，采用全细胞荧光原位杂交技术对标本直接进行检测，具有高度的特异性；b)采用萤光素(FITC，Cy3)标记寡核苷酸探针，安全、无放射性、无污染，并且具有较高的敏感性；c)该方法的建立可广泛用于孕妇产前筛查，为新生儿围产期GBS感染的控制和治疗提供新的途径；d)该方法操作简单，不需要特殊仪器及试剂等，可在广大医院(包括各级基层医疗卫生机构)或科研单位推广应用。(5)推广情况：孕产妇的GBS筛查在欧美等发达国家早已成为孕前/产前的常规检查项目，而在国内，由于缺乏准确、方便、有效的GBS检测方法，该项检查尚未得到普及，因此GBS筛查在国内具有广泛的应用前景。随着国家对优生优育工作的重视，一方面中央部委及各级卫生主管部门相继出台相应法规和文件，要求各级医疗卫生单位，重视和加强优生优育的普及教育及临床医疗工作，采取切实措施为提高国民身体素质作出努力。另一方面，政府对优生优育工作的投入不断加大。该项目的选题符合国家的迫切需求，其诸多优势可以确保其应用于各级临床医疗卫生单位，在产前对孕产妇GBS进行筛查，力求早期发现，及早干预治疗，有望大幅降低新生儿围产期GBS感染，提高新生儿存活率。在可以预见的将来，随着对围产期GBS感染的认识的提高，GBS检测极有可能成为常规的产前筛查项目，纳入中国的优生优育政策之中，并成为优生优育工作中重要的一环，因此其应用前景是极为看好的。