[00975834]微生物中和与交叉中和抗原的快速筛选与鉴定技术
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技术详细介绍
发明了一种采用蛋白质组学技术与免疫攻毒相结合的高通量筛选微生物中和与交叉中和抗原的方法。该方法以微生物为对象,采用免疫蛋白质组学技术,确定具有免疫原性和交叉免疫原性的蛋白质。进一步采用免疫攻毒,评价这些蛋白的中和作用。这一技术能迅速确定中和原,达到高效、快速、经需、考用地优选保护性免疫原的目的。因此,该法一方面可以快速确定具有中和墨芎原性的位点,另一方面避免了基因克隆的盲目性,提高了制备高效疫苗靶点的效率。采用该技术对8种细菌的免疫交叉水平进行了评价,成功地筛选并鉴定了13个跨4~5种属的高度交叉免疫反应蛋白。结合体外抑菌试验,初步证明1个副溶血弧菌的蛋白具有较强的中和原性。同时,应用免疫蛋白质组学的技术,从54个嗜水气单胞菌外膜蛋白中,发现8个具有免疫原性,并通过免疫和攻毒实验,证明其中3个具有较好保护原性,可望作为嗜水气单胞菌的疫苗候选成分。在这3个蛋白中2个具有明显的交叉保护原性,可作为单胞菌的多价疫苗靶位。先后申请国家发明专利3项,其中1项已授权(zL200410033282·1);获得海洋创新成果奖科技奖二等奖和福建省科技进步三等奖各1项。
发明了一种采用蛋白质组学技术与免疫攻毒相结合的高通量筛选微生物中和与交叉中和抗原的方法。该方法以微生物为对象,采用免疫蛋白质组学技术,确定具有免疫原性和交叉免疫原性的蛋白质。进一步采用免疫攻毒,评价这些蛋白的中和作用。这一技术能迅速确定中和原,达到高效、快速、经需、考用地优选保护性免疫原的目的。因此,该法一方面可以快速确定具有中和墨芎原性的位点,另一方面避免了基因克隆的盲目性,提高了制备高效疫苗靶点的效率。采用该技术对8种细菌的免疫交叉水平进行了评价,成功地筛选并鉴定了13个跨4~5种属的高度交叉免疫反应蛋白。结合体外抑菌试验,初步证明1个副溶血弧菌的蛋白具有较强的中和原性。同时,应用免疫蛋白质组学的技术,从54个嗜水气单胞菌外膜蛋白中,发现8个具有免疫原性,并通过免疫和攻毒实验,证明其中3个具有较好保护原性,可望作为嗜水气单胞菌的疫苗候选成分。在这3个蛋白中2个具有明显的交叉保护原性,可作为单胞菌的多价疫苗靶位。先后申请国家发明专利3项,其中1项已授权(zL200410033282·1);获得海洋创新成果奖科技奖二等奖和福建省科技进步三等奖各1项。