[00957607]低温机械灌注保护供肝的关键技术体系建立和临床应用

所属科学技术领域：人口与健康领域。 公民逝世后捐献(CDCD)供肝已成为中国肝移植的主要供体来源。由于CDCD供肝自身病理状态，经历冷保存(SCS)后的CDCD供肝移植往往导致各种致命性并发症。与SCS相比，低温机械灌注技术(HMP)可更有效保护供肝。但该技术并未在临床得到广泛应用，主要原因在于：供肝在SCS中损伤机制不清，HMP研究缺乏实验模型，HMP保护机制不清，缺乏成熟的人肝HMP灌注机。基于上述核心问题，课题组历经7年研究，取得如下国际领先创新性成果： 1、阐明了CDCD供肝在SCS过程中的损伤机制：I类供肝在SCS中损伤机制包括线粒体功能紊乱(表现为组织内ALDH2下降激活MAPK通路等)，内质网功能紊乱(表现为PP2A活性增强抑制AKt通路等)。而II类供肝损伤包括，KLF2/eNOS表达下降相关血管内皮损伤，HIF-1α表达不足相关氧化应激损伤，NLRP3-caspase1介导细胞焦亡损伤。 2、率先建立HMP肝脏动物模型：构建小动物肝脏HMP体系，发现了低温下灌注液携氧规律。特别是基因敲除小鼠肝脏HMP模型的首次建立，解决了HMP分子机制研究缺乏强有力实验手段的问题，该成果发表在国际权威杂志Transplantation。此外，率先建立大动物肝脏HMP模型，用于临床转化研究。 3、阐明了HMP保护CDCD供肝的机制：(1)灌注液流动，对供肝提供氧分，清除蓄积的DAMPs及ROS；(2)提供流体剪切力诱导KLF2保护血管内皮；(3)刺激Keap1/Nrf2-ARE通路，发挥抗氧化作用；(4)抑制NLRP3-caspase1介导的细胞焦亡；(5)刺激SIRT-1表达，抑制NFκB-p65减轻炎症。 4、研发自主知识产权的肝脏HMP原型机，并进行临床试验，为临床应用奠定基础。 迄今，项目组在国内外权威期刊发表论文84篇(SCI 33篇)，获专利8项。研究成果已在二十余家大型三甲医院成功推广。特别是HMP辅助自体肝移植技术进行肝癌切除，将国际报道的围手术期死亡率19.5％下降至4％。项目组牵头制定国内、国际共识，并与牛津大学签定合作计划，受邀在“美国移植大会”学术交流。该成果鉴定为“国际领先”，并“引领行业发展与规范”。