[00896989]葡萄球菌肠毒素基因分型及高通量分子检测试剂盒的研制
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技术详细介绍
研制了两种分别从基因及蛋白水平上检测鉴定葡萄球菌肠毒素的检测试剂盒。建立了16种葡萄球菌肠毒素基因分型检测的PCR技术，分析了国内122株葡萄球菌肠毒素基因分布特点。通过应用含不同融合肽的重组葡萄球菌肠毒素分别作为免疫原和筛选蛋白，制备并亚克隆获得8株葡萄球菌肠毒素单抗杂交瘤细胞株，进一步筛选到特异性强、亲和力高、可夹心配对的肠毒素群特异性单抗4A2、5C12，研制出可用于多种葡萄球菌肠毒素检测的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)试剂盒。将DAS-ELISA法用于乳房炎奶牛的跟踪检测，总结出肠毒素和乳房炎的相关性，提出“奶汁毒素筛查法”优质原料奶生产模式。试剂盒在天津、河南等奶牛场推广应用，企业收入约3500万元以上，经济效益显著，同时可降低食源性疾病的发生。