[00881871]nm23基因逆转肺癌转移表型的实验研究

应用单细胞克隆技术成功构建人大细胞高转移肺癌细胞系L9981和低转移肺癌细胞系NL9980，并鉴定L9981具有nm23-H1基因缺失、mRNA和蛋白表达缺失，体外增殖、克隆形成率、侵袭能力、裸鼠体内成瘤性，移植瘤远处转移率均显著高于NL9980；应用基因重组技术成功构建PLXSN-nm23H1逆转录病毒表达载体，并成功转染L9981细胞株；国内外首次证明nm23-H1基因转染：（1）恢复L9981细胞株的nm23-H1基因DNA多态性、mRNA和蛋白表达功能；（2）能上调“肺癌转移抑制级联“正性相关基因β-catenin、E-cadherin、TIMP-1和CD44S基因mRNA、蛋白表达水平，下调“肺癌转移抑制级联“负性相关基因VEGF、CD44V6、MMP-2和C-Met基因mRNA表达水平；（3）抑制L9981细胞株的增殖、体外侵袭力，裸鼠体内的成瘤性，并逆转肺癌转移；（4）抑制L9981细胞株的迁移运动能力、下调细胞骨架相关蛋白a-actin、Integrin-α表达水平；（5）抑制“肺癌转移抑制级联“信号通路相关基因和关键酶活性；（6）从理论上证明了“肺癌转移抑制级联“假说。