[00867028]抱子丝菌病体外快速诊断试剂条的研发
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技术详细介绍
本项目根据球形孢子丝菌的细胞壁特点，联合机械法、化学法、酶解法，设计并开发了适用于球形孢子丝菌胞壁蛋白的粗提方法，该方法可以获得多种胞壁蛋白，回收率高，并可对特异性抗原成分进行进一步纯化（该部分内容已经申请一项国家发明专利）。对粗提的孢子丝菌病患者血清进行了免疫印迹筛选并结合LC/MS方法对蛋白条带的序列进行检测，鉴定出球形孢子丝菌HSP70_l-8和HSP70_5蛋白。利用大肠杆菌原核表达体系构建了HSP70.1-8和HSP70_5表达体系，获得了相应质粒表达的重组蛋白并通过重组蛋白免疫新西兰兔后，获得了高纯度的多克隆抗体（该部分内容已经申请三项国家发明专利）。利用胶体金免疫层析方法，制备出了靶点为三种重组蛋白的孢子丝菌病检测试剂条。