[00834864]苏云金杆菌毒蛋白基因克隆和工程菌株构建
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技术详细介绍
将地衣芽孢杆菌（B.licheniformis）的热稳定α-淀粉酶基因通过原生质体转化的方法引入Bt.ken-Ag，构建成高效工程菌株，解决了发酵液中淀粉固形物含量高和粘度大的问题。以pUC19为母体，加入pUC4K的Km抗性基因和Bt.ken-Ag的复制起始区，构建成穿梭载体pHV-1，利用该载体克隆了新分离的未定血清型的Bt.9510 Cry1C基因（对甜菜夜蛾具有很强的毒杀作用），将Cry1C置于α-淀粉酶启动子控制之下，构建成pHV-cryIC质粒，并对重组质粒的生物学进行了深入研究。该质粒已在Bti.4Q8中实现了表达，对甜菜夜蛾有一定的毒杀作用。