[00781651]猪重要传染病关键防控技术的研究与应用

主要技术内容：生猪产业在农村经济发展中发挥着重大作用，传染病是严重威胁养猪生产效益和公共卫生安全的重要因素。该项目针对猪传染病防控技术及其相关产品不完善或缺乏等关键科技问题，重点开展了猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪流行性腹泻(PED)等7种疫病的关键防控技术研究。主要技术内容涉及检测技术、免疫增强剂、免疫防控等方面，实现了创新技术和研究成果的集成应用，创造了显著经济效益，取得了如下创新性成果： 1.创建了两种多重RT-PCR检测技术。建立了快速鉴别猪瘟病毒-经典/高致病性PRRSV的多重RT-PCR技术和鉴别PEDV-猪传染性胃肠炎病毒-猪A型轮状病毒的多重套式RT-PCR技术。两种方法均可检出pg级别的病毒核酸，突破了多重PCR灵敏度低于单项PCR的技术难题，提高了混合感染病例的诊断效率。组装了2个试剂盒。 2.创制了基于单克隆抗体的PEDV抗原检测胶体金免疫层析试纸条。表达了PEDV核衣壳(N)蛋白，获得了4株分泌N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞。以单抗为基础制备了快速检测PEDV抗原的胶体金免疫层析试纸条，突破了基于多克隆抗体制备的胶体金试纸条检测结果假阳性率高的技术难题，解决了基层缺乏快速诊断PED方法的科技问题，组装了试剂盒。 3.研发了3个病毒抗体ELISA检测试剂盒。分别以表达的PCV2衣壳蛋白、PEDV N和EMCV非结构蛋白2C为包被抗原，建立了检测PCV2、PEDV和EMCV抗体的ELISA技术，解决了检测抗原难以制备的关键技术问题，组装了3个试剂盒。 4.制备了2种免疫增强剂。制备了高致病性PRRSV特异性转移因子和猪瘟病毒特异性转移因子(STF)，突破了STF制备和保存的关键技术，改善了PRRSV和猪瘟疫苗的免疫效果，解决了猪群PRRS和猪瘟疫苗免疫效果差的关键科技问题。 5.优化了猪瘟和PRRS的免疫防控程序。证明了经典PRRSV疫苗株VR-2332和高致病性疫苗株JXA1-R的免疫学特征不同，提出了仔猪首次免疫经典或高致病性PRRS弱毒疫苗时的合理接种剂量和接种时间；明确了携带猪瘟母源抗体仔猪的猪瘟弱毒苗的接种剂量和接种时间，证明了过度增加疫苗剂量不能提高特异性抗体水平。解决了猪瘟和PRRS免疫程序混乱的关键技术问题。 成果产生的价值依托该项目，鉴定科技成果2项，获保定市科技进步一、二等奖各1项，发表论文7篇，完成硕士论文3篇，取得国家发明专利1项。在河北、河南、山东、天津、内蒙等地广泛推广应用了项目成果。2014年-2016年间，受益母猪33.2万头、仔猪147.9万头，新增利润12387.5万元。培训技术人员15次，累计培训约8000余人，提升了相关人员的业务能力。该项目对课题组的5名青年教师起到了积极带动作用，培养了15名硕士生、30多名本科生，为社会培养了高水平的畜牧兽医人才。