[00755455]特种养殖鳄鱼抗菌肽的分离鉴定与应用开发

该技术成果全面研究了暹罗鳄不同组织粗提物的抗菌活性，发现血液、肝脏和卵巢提取物对金黄色葡萄球菌的抗菌活性最强。通过蛋白质层析技术结合非变性酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(AU-PAGE)纯化了白细胞粗提物中的一种抗菌活性物质，经过Shotgun串联质谱分析，推测该活性物质是组蛋白H1样的蛋白或肽段，并将其命名为Cshistidin。克隆了暹罗鳄hepcidin cDNA，其ORF编码一个99-aa的前肽原preprohepeidin。成功构建了暹罗鳄hepcidin基因的三种真核表达重组质粒，分别用于表达单一的暹罗鳄hepcidin成熟肽Cshepc。用甲醇诱导的方法在毕赤酵母KM71中实现了目的产物的高效表达。表达上清对四株细菌均有明显的抑菌效果，表达产物对芽孢枯草杆菌(Bacillus subtilis)的抑菌活性最强，对水产病原菌温和气单胞菌(Aeavmonas sobria)的活性较弱。该技术研发的鳄鱼抗菌肽(Hepeidin)可用于开发新型抗菌药物，可在转基因动植物中的应用，可应用于食品或饲料添加剂等，具有广阔的应用前景。预计可产生经济效益：新增产值200万元，新增利税：20万元；社会效益：新增产值5000万元，新增利税500万元。