[00359794]新型镇痛剂-重组平颏海蛇神经毒素

该成果的平颏海蛇神经毒素基因是从平颏海蛇(Lapemishardwicki)毒腺cDNA文库中筛选克隆得到的新基因，共获得三个编码短链神经毒素的基因，分别称为sn12、sn36和sn160。这三个cDNA都编码81个氨基酸，等电点约为8.5，分子量约为7,000道尔顿，包括21个氨基酸的信号肽和60个氨基酸的成熟肽、彼此之间只有一个氨基酸残基的差异，位于第46位。采用PCR方法改造并扩增该三个cDNA，克隆到表达载体PETTRX上，以BL21-DE3为表达宿主，经IPTG诱导，三种神经毒基因在大肠杆菌中得到高效的可溶性融合表达。重组隔合蛋白经过Ni<'2+>ChelatingSephrose亲和色谱和Sephacryl-S100HR凝胶色谱得到有效纯化，纯度达到98%以上，纯化的重组毒素蛋白对NIH小鼠进行腹腔注射，小鼠有明显的神经中毒反 应，三种短链神经毒素之间活性有区别。进一步的动物实验证明重组平颏海蛇神素具有很好的镇痛剂，用于风湿性关节痛、三叉神经痛、坐骨神经痛、肋间神经痛、晚期癌肿痛和麻风神经痛等，其主要优势在于：止痛作用快、效果好，连续用药不会产生耐药性，无成瘾性，用药剂量少，一般没有严重的毒副作用。其中，对晚期癌肿痛治疗的研究有着很重要地意义。该成果建立了海蛇神经毒素的大肠杆菌表达系统和重组神经毒素的鉴定的技术。而且为开发新的镇痛药物和治疗神经系统疾病药物奠定了基础。