[00328211]固定化重组头孢菌素脱乙酰酶生产
联系人：生物工程学院
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技术详细介绍
本项目利用重组大肠杆菌异源表达来自枯草芽孢杆菌中的CAH基因，发酵生产头孢菌素脱乙酰酶蛋白。由于重组蛋白表达量高，采用简单的硫酸铵分级沉淀方法即可达到很好的纯化效果，极大程度地缩减了蛋白纯化的成本。
在工业应用中，将游离酶固定在载体上可以实现多次重复利用，产物分离容易，可以连续操作。在众多固定化酶方法中，由于制备的固定化酶稳定性好，共价结合的方法在工业中最为常用。本项目采用共价结合的固定化方法，在温和条件下将游离酶连接在亲水性环氧基载体上，得到的固定化酶活力回收高，稳定性好，重复使用次数高。
应用前景：
头孢菌素脱乙酰酶CAH[EC3.1.1.41]在头孢类抗生素生产中应用广泛，该酶可以催化头孢类抗生素3位脱乙酰反应，生成重要药物中间体。固定化CAH产品主要应用于抗生素药物生产中，最常用的反应是将重要药物中间体7-ACA水解为D-7-ACA，且反应完全，转化率高。