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[00283564]一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用

交易价格: 面议

所属行业: 生物医药

类型: 发明专利

技术成熟度: 正在研发

专利所属地:中国

专利号:CN201110289796.3

交易方式: 技术转让 技术转让 技术入股

联系人: 江南大学

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所在地:江苏无锡市

服务承诺
产权明晰
资料保密
对所交付的所有资料进行保密
如实描述
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技术详细介绍

摘要:一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用,属于发酵工程中生物技术领域。具体涉及一种构建遗传工程菌的方法、重组酶酶学性质研究及其在转化L-谷氨酸产GABA上的应用。首先,PCR扩增获得植物乳杆菌GB 01-21谷氨酸脱羧酶(GAD)基因,构建了重组质粒pET-28a-lpgad,并在 BL21(DE3)成功表达,其次,粗酶液采用Ni柱亲和层析纯化获得重组GAD,并对其酶学性质进行初步研究,用于指导转化条件的优化。最终5L发酵罐上进行转化实验,GABA累积浓度可达204.5g/L,摩尔转化率为97.92%,为进一步工业化应用打下了良好的基础。
摘要:一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用,属于发酵工程中生物技术领域。具体涉及一种构建遗传工程菌的方法、重组酶酶学性质研究及其在转化L-谷氨酸产GABA上的应用。首先,PCR扩增获得植物乳杆菌GB 01-21谷氨酸脱羧酶(GAD)基因,构建了重组质粒pET-28a-lpgad,并在 BL21(DE3)成功表达,其次,粗酶液采用Ni柱亲和层析纯化获得重组GAD,并对其酶学性质进行初步研究,用于指导转化条件的优化。最终5L发酵罐上进行转化实验,GABA累积浓度可达204.5g/L,摩尔转化率为97.92%,为进一步工业化应用打下了良好的基础。

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