[00283564]一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用
交易价格:
面议
所属行业:
生物医药
类型:
发明专利
技术成熟度:
正在研发
专利所属地:中国
专利号:CN201110289796.3
交易方式:
技术转让
技术转让
技术入股
联系人:
江南大学
进入空间
所在地:江苏无锡市
- 服务承诺
- 产权明晰
-
资料保密
对所交付的所有资料进行保密
- 如实描述
技术详细介绍
摘要:一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用,属于发酵工程中生物技术领域。具体涉及一种构建遗传工程菌的方法、重组酶酶学性质研究及其在转化L-谷氨酸产GABA上的应用。首先,PCR扩增获得植物乳杆菌GB 01-21谷氨酸脱羧酶(GAD)基因,构建了重组质粒pET-28a-lpgad,并在 BL21(DE3)成功表达,其次,粗酶液采用Ni柱亲和层析纯化获得重组GAD,并对其酶学性质进行初步研究,用于指导转化条件的优化。最终5L发酵罐上进行转化实验,GABA累积浓度可达204.5g/L,摩尔转化率为97.92%,为进一步工业化应用打下了良好的基础。
摘要:一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用,属于发酵工程中生物技术领域。具体涉及一种构建遗传工程菌的方法、重组酶酶学性质研究及其在转化L-谷氨酸产GABA上的应用。首先,PCR扩增获得植物乳杆菌GB 01-21谷氨酸脱羧酶(GAD)基因,构建了重组质粒pET-28a-lpgad,并在 BL21(DE3)成功表达,其次,粗酶液采用Ni柱亲和层析纯化获得重组GAD,并对其酶学性质进行初步研究,用于指导转化条件的优化。最终5L发酵罐上进行转化实验,GABA累积浓度可达204.5g/L,摩尔转化率为97.92%,为进一步工业化应用打下了良好的基础。