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本发明公开了一种利用外源多胺提高龙眼胚性愈伤组织生长量和类黄酮含量 的方法 ,包括外源多胺种类与浓度的筛选、胚性愈伤组织培养时间的确定。所述外源添 加剂中多胺包括腐胺 ,亚精胺 ,精胺及抑制多胺合成的添加剂D-精氨酸;所述培养时间 为继代培养后20 d、 25 d、 30 d和35 d。基本培养基为MS培养基 ,添加1.0 mg∙L−1的 2,4-D , 20 g ∙L−1的蔗糖 , 7 g ∙L−1的琼脂 , pH为5.8。外源添加剂的终浓度为0.01 mmol∙L−1;每个培养皿的继代起始量为0.1 g;在环境温度为25 ℃的恒温培养室内进行 暗培养。在试验的4种外源添加剂中 ,以0.01 mmol∙L−1的精胺处理对龙眼胚性愈伤组织 生长与类黄酮积累的促进作用最佳 ,在培养30 d时 ,该处理下胚性愈伤组织的生长量与 类黄酮积累量分别较CK增加了12.64%和11.96% ,类黄酮生产率较CK提高了26.11%。
产业化前景 :该发明采用植物组织培养技术 ,通过在龙眼胚性愈伤组织继代培养基中 添加适宜浓度的多胺 ,较传统培养方法 ,实现了龙眼胚性愈伤组织类黄酮生产速率的显 著提升。从而弥补了使用龙眼胚性愈伤组织工厂化生产植物功能次生代谢产物类黄酮的 空白 ,并能实现规模化生产。