[01845357]牛新孢子虫病间接ELISA检测试剂盒

一、技术（成果）简介 利用新孢子虫体外重组表面蛋白dNcSRS2蛋白作为包被抗原，对各项条件进行优化，确定判定标准，建立了检测新孢子虫血清抗体的间接ELISA方法。经对多例血清检测表明，所建立的诊断试剂盒重复性好、特异性强、灵敏度高。与进口的IFAT及2种商品化ELISA试剂盒的检测结果相比较，符合率均达到92%以上。首次利用重组蛋白建立的牛新孢子虫病诊断盒，该方法的建立将为牛新孢子虫病的诊断与流行病学研究提供有效的技术手段。也是我国第一个新牛新孢子虫病血清抗体检测试剂盒。2006年进一步扩大了检测样品量，对1000余份牛（奶牛、牦牛）血清抗体进行检测，发现所建的ELISA试剂盒具有良好的重复性和稳定性，保存6个月后，依然保持良好的检测效果，能够替代进口产品用于牛新孢子虫血清抗体检测。 二、市场分析及投资预算 我国正在大力发展奶业，2006年6月末全国奶牛存栏已达1418万头，到2010年将达1535万头。通过血清检测，淘汰阳性牛，减少牛只流产，增加奶、肉产量，建立健康无新孢子虫感染牛群，是目前防治新最有效的方法。因此该方法一旦获得生产许可投放市场能够产生巨大的经济效益。（直接经济效益：批量生产后价格有望达到10元人民币/头，节约40元/头，如果检测1000万头份，仅试剂盒购买就节约4亿元人民币。其减少奶牛流产、提高产奶量和奶品质量等间接经济效益无法简单估量。投资预算：约500万人民币。 三、投入设备及必备条件 生产面积：60～200 m；仪器设备：200万人民币。 具备生物安全二级实验室。 四、推广前景及意义 本课题组在国内率先进行新孢子虫病研究，在本项目执行之前通过购买进口试剂盒对某些地区奶牛血清抗体检测，初步证实新孢子虫病在奶牛群中的存在，而且严重影响了养牛业的发展；但由于进口试剂盒价格昂贵，没有进行大范围的检测。本研究成功研制了牛新孢子虫病血清抗体间接ELISA检测试剂盒，经与进口产品的各项指标比较，所建立的试剂盒完全可以替代进口产品用于临床检测。目前奶牛疾病严重制约我国奶牛业的发展，流产是养牛业的重要疾病之一，牛流产后导致的经济损失包括奶牛空怀、产犊量减少、奶产量大幅下降、检查和治疗费用等多项直接和间接经济损失；新孢子虫病是牛流产的主要原因之一，由于进口检测试剂盒价格昂贵，无法大范围临床应用，使得国内对牛新孢子虫病的流行和危害没有足够的认识。本试剂盒如果能顺利申报、获得生物制品证书，在实验室即可大量生产，满足国内养牛业进行新孢子虫病血清抗体检测的需要，从而进一步了解和认识新孢子虫病的危害，制订防控措施，减少新孢子虫病造成的经济损失。 五、目前推广应用情况 该试剂盒研制成功后，已经应用于各种牛只2000余份；正在对其应用过程中存在的问题进一步调试。