[01793581]五类新药红茂草生物碱药学研究

①课题来源与背景 红茂草在《本草纲目》中记载为石长生,民间全草入药,能清热解毒、消肿止痛、杀虫,治疗扁桃腺炎,咽喉痛、淋巴结核,秃疤,疥癣等症。红茂草含有多种异喹啉类生物碱：异紫堇啡碱,紫堇碱,异紫堇碱、阿原片碱等,其中异紫堇碱含量最高。本课题组前期实验室基础研究发现,红茂草生物碱具有保肝,抗肿瘤,抑菌,抗病毒,抗炎,增强免疫力等活性,红茂草对化脓性淋巴结核创伤也有显著疗效。但是目前关于红茂草胶囊中试生产,对结核菌的抑菌作用及安全性等方面的研究还未见报道。 ②究目的与意义 红茂草民间多用于治疗开放性淋巴结核和各类创伤性炎症,本课题前期工作发现红茂草对结核病有良好的治愈作用,对胃溃疡和外科创伤有良好的愈合作用。本项目拟通过对红茂草胶囊的制备和优化工业化生产工艺参数,制定中药五类新药《红茂草生物碱胶囊生产工艺规程》;按拟定的工艺中试生产3～5批产品; 在常规检验控制指标的基础上,建立中药五类新药《红茂草生物碱胶囊的质量标准（试行）》; 通过红茂草生物碱对结核分枝杆菌的抑菌作用和组学研究, 确定用于结核病治疗和预防的常用剂量及用药周期。本项通过研究地方习用药材红茂草生物碱进行中试生产和临床前药学研究,为红茂草的开发和生物碱胶囊的临床应用打下坚实基础。 ③要论点与论据 对地方习用药材红茂草进行规范化种植研究,并建立红茂草规范化种植标准操作规程,在不同地理条件试种50多亩,每亩产红茂草250kg。在普尔康药业有限公司对红茂草生物碱进行工业化中试生产,共生产四批红茂草胶囊400kg,以备临床实验应用。小鼠急性毒性实验结果显示,LD50=16.7136g/kg,相当于人临床剂量的44.5696倍。19.814 g/kg剂量组胸腺指数与空白组差异显著;红茂草胶囊的体内药物动力学研究结果显示,各时间点血浆中异紫堇碱的浓度均符合一室模型。给药组的药时曲线下面积7002.312mg/Lomin,达峰浓度Cmax 13.3 mg/L,达峰时间Tmax 40 min,消除半衰期T1/2z 652.712 min,说明红茂草胶囊大鼠口服吸收效果好,达峰时间短,达峰浓度高,生物利用度高。红茂草生物碱对牛型结核分枝杆菌的MIC为300 μg/ml,IC50为146.33μg/ml,异紫堇碱对牛型结核分枝杆菌的MIC为400 μg/ml,IC50为183.02 μg/ml,并发现红茂草生物碱影响牛型结核分枝杆菌渗透性,可改变牛型结核分枝杆菌的细胞形态。对人型结核分枝杆菌和耐药型结核分枝杆菌的MIC为200 μg/ml和IC50是65.34 μg/ml,400μg/ml 和87.52 μg/ml。牛型结核分枝杆菌全基因组测序结果显示其基因组序列全长4357100 bp,基因组包含4145个编码基因,占全基因组的90.28%,在红茂草生物碱作用下,牛型结核分枝杆菌体内上下调基因共66个,上调基因39个,下调基因27个。非靶向代谢组学分析共找出19种显著性差异代谢物。研究红茂草异紫堇碱对LPS诱导 RAW 264.7 细胞释放炎性因子的影响发现,红茂草异紫堇碱能够抑制促炎因子IL－1β、IL－6、PEG－2 和TNF－ α 的释放;促进抗炎因子 IL－10 和 NO 的释放来抑制 LPS 诱导的 RAW 264.7 细胞炎症反应。红茂草异紫堇碱对小鼠实验性肝损伤的保护作用结果证明,不同剂量的异紫堇碱给药组血清中 AST、ALT活性显著降低,肝组织匀浆 MDA 含量显著减少;抗氧化酶 T-SOD 活性显著升高;病理切片显示红茂草异紫堇碱作用后肝组织损伤有不同程度地减轻,高剂量的异紫堇碱对肝组织的保护程度最为明显。 ④创见与创新 （1）确定《以五类新药红茂草胶囊的药学研究》项目进行中试生产和临床前药学研究,取得较好成果,可作为治疗和预防结核病的候选药物,有较大的临床应用价值。 （2）提出了《红茂草规模化种植技术规范》和《红茂草生物总碱胶囊质量标准》2个企业标准。具有超前性,为新药生产和开发奠定了基础。 ⑤社会经济效益,存在的问题 本项目通过指导规范化的种植、优选工业化制备工艺参数、确定质量控制标准、动物模拟药效研究,开发出治疗和预防结核病的中药五类新药“红茂草生物碱胶囊”,供临床前研究。从临床应用情况看,用红茂草治疗各型结核,可使病期缩短,效果显著,降低病人的费用,减少病人的经济负担。 ⑥历年获奖情况 （1）2014年8月,红茂草生物碱抗炎机制与新药开发研究,天水市科技进步二等奖 （2）2014年9月,红茂草生物碱抗炎机制与新药开发研究,甘肃省高校科技进步三等奖; （3）2017年7月,红茂草异紫堇碱对小鼠肝脏保护作用的病例切片观察,第十一届“挑战杯”甘肃省大学生课外学术科技作品三等奖 （4）2016年9月,西北野生药用植物红茂草资源的研究与利用,甘肃省科技情报学会科学技术奖三等奖。