[01752926]“尿毒清”的研制与推广

肾脏病是一种常见病，其发病率约占自然人群的2%，不论什么原因的肾病都可造成慢性进行性肾实质损害，导致慢性肾功能衰竭（以下简称CRF）。每年每百万人群中约有96～100人由肾脏病发展到CRF，尿毒症是CRF的终末阶段，属于一种进行性、不可逆的临床综合征，严重危害着人类健康，是现代临床肾脏病学最复杂和最难处理的问题之一。因此，对CRF的防治一直是全球关注的难点和热点医学课题。中药复方新药尿毒清颗粒1991年被总后勤部卫生部批准为军制FPll037，93年又获军制流字(1993)第12号，以非标制剂在全军医院内交流试用，1996年2月获卫生部颁发的新药证书[(96)卫药证字Z-14号]和生产批文[批准文号：(96)卫药试字Z-01号]，是第一个用于治疗CRF的纯中药制剂，现已于广州康臣药厂生产，用于治疗CRF，填补了中成药治疗CRF的空白。其技术特征如下。1、处方研究 根据中医对CRF病机认识，按照中医辨证及理法组方，以大黄甘草汤与黄芪防己汤方为基础加减，经过长期临床实践反复修改而成，意在解救尿毒并顾扶正，具有通腑降浊、健脾利湿、活血化瘀的功效。2、药学研究包括生产工艺、质量标准和稳定性研究。生产工艺研究中，直接采用水煎煮提取的方法，采用一步制粒制成无糖型颗粒剂；质量标准研究中，建立了大黄和何首乌、白芍、丹参、苦参以及柴胡的TLC鉴别方法和芍药甙的含量测定方法；稳定性研究：室温下考察尿毒清颗粒18个月，各项指标均符合规定。3、主要药效学研究 运用大鼠腺嘌呤致CRF模型、大鼠5／6肾脏切除CRF模型和小鼠电凝摘除肾脏所致的CRF模型进行了尿毒清的药效学试验，主要观察指标有BUN、Scr水平、血红细胞系以及病理变化，证实尿毒清具有降低BUN、Scr水平，改善肾功能的作用，对改善肾性贫血，纠正水电介质代谢紊乱，改善肾脏病理变化也有明显作用。为了使药效学试验结果可靠，该课题在动物模型上作了深入研究。改良了腺嘌呤CRF型，采用小剂量腺嘌呤(0.5％，国外报道为0.75%)，以延长造模时间，更有利于对CRF的药效观察，达到了CRF型病理过程的长期相对稳定的要求，适合中药作用缓慢、多靶点改善全身症状的特点。该课题首次采用了电凝摘除小鼠肾脏的CRF模型(以往国内均用大鼠作实验动物)；首次采用计算机图像分析方法，对2,8-二羟基腺嘌呤在动物肾组织沉积的程度做定量分析，建立了一套适合中药对CRF药效试验方法，撰写了上海科技出版社出版发行的《中药新药研制开发技术与方法》一书中的“急慢性肾功能衰竭药效学研究的设计与方法”，并获得军队科技进步三等奖。4、毒理研究 急性毒性试验表明：尿毒清灌胃小鼠的最大耐受量为224g／kg。长期毒性试验表明：大鼠口服尿毒清34g／kg(相当于推荐临床剂量40倍)连续6个月，未显示其药物性毒性反应。5、临床试验 1993年国家卫生部药政管理局下达了ZL-57号尿毒清新药临床研究的批件，据此自1994年3月至1995年7月，由成都中医药大学附属医院负责，北京中日友好医院、中国中医研究院西苑医院、广州中山医科大学第一附属医院、广州军区武汉总医院及南京军区福州总医院参加，共同对中药新药尿毒清颗粒进行Ⅱ期临床试验，共观察CRF脾肾气虚湿浊证及脾肾气虚血瘀证住院患者420例，其中尿毒清颗粒治疗组300例，包醛氧淀粉对照组120例。试验结果：治疗组显效率为20.67%(62／300)，总有效率为69.33%(208／300)，对照组显效率为10%(12／120)，总有效率为44.17%(53／120)。经统计学处理，两组显效率及总有效率差异均有非常显著意义(P＜ 0.01)，治疗组优于对照组。尿毒清颗粒治疗CRF脾肾气虚湿浊证的显效率为24.34%(37／152)，总有效率为69.08%(105／152)；治疗CRF脾肾气虚血瘀证的显效率为16.89%(25／148)，总有效率为69.59%(103／148)，经统计学处理，两种证型间疗效差异无显著意义(P＞0.05)，同时，分别与对照组比较，差异均有显著意义(P＜ 0.05)，表明尿毒清颗粒对两种证型均有效，且疗效均优于对照组。临床试验过程中，未发现尿毒清颗粒有明显毒副作用。综上所述，尿毒清颗粒克服了已有药物治疗CRF时疗效不理想或费用昂贵等缺点，通过全身性的降尿毒物质，稳定肾功能，改善肾性贫血，达到控制或改善CRF氮质血症期和尿毒症早期症状的目的。针对尿毒清颗粒剂存在如下缺点，①剂型单一；②采用传统的水煎煮法，脂溶性成分提取不完全，从而影响疗效；③水提浸膏得率为23%，含大量鞣质、淀粉等杂质，影响制剂稳定性，服用量大；④颗粒剂制备加入大量辅料，服用量进一步加大；⑤质量标准不完善，如没有含量测定的关键质量控制方法等。因而我们按照国家药品管理局关于新药“中药、天然药物注册分类9”的要求，对颗粒剂进行了剂型改革，改成片剂，现已完成了临床前所有研究工作并进行了申报。　　尿毒清片剂的技术特征与创新主要体现在：1、制备工艺研究方面 根据处方分析，选定大黄、丹参等4味药材进行复方CO_2超临界工艺研究，采用正交设计，以大黄中结合蒽醌、丹参中丹参酮IIA及萃取物收率为考核指标，对萃取压力、萃取温度、CO_2流量等进行考察，确定了萃取最佳工艺条件；通过进行多种分离纯化工艺方法比较，确定采用先进的吸附澄清工艺，通过正交设计，确定了澄清剂的用量、温度等条件；采用先进的喷雾干燥方法，药液在瞬间即可干燥，有效成分损失较小；通过比较实验，摸索出尿毒清浸膏的喷雾干燥工艺参数。2、质量标准研究方面 在药典标准的基础上重新修订了内控药材质量标准，根据测定结果，考虑到药材产地、加工炮制、贮藏等因素和《中国药典》中含量限度规定，君药黄芪中黄芪甲苷的含量不得低于0.045%，白芍中芍药苷暂定含量不少于1.2%（均高于药典水平），方可用于本制剂投料；在原标准的基础上增加了君药黄芪甲苷的含量测定，并进行了方法学考察；增加了丹参、川芎的薄层色谱鉴别，并对大黄、何首乌的色谱条件进行了优化。3、药效学研究方面 观察了对大鼠腺嘌呤及5/6肾切除引起的CRF病理模型的影响，辅助实验观察了对大鼠的利尿作用及血瘀大鼠血液流变学的影响，结果证明：尿毒清给药组无论是颗粒剂还是片剂与模型空白对照组之间，在反映主要药效的血BUN、Scr、P、K水平、RBC、HGB、HCT指标均有明显改善（P＜ 0.05，0.01），具有统计学意义，且部分结果呈一定量效关系。肾脏的肉眼观察和组织病理学检查亦表明给药各组的肾脏病变比单独造模组为轻，说明尿毒清片剂与颗粒剂治疗肾衰大鼠同样有效，在改善贫血症状方面，尿毒清片优于颗粒剂。实验结果还表明两种剂型均可降低血瘀大鼠的全血粘度，片剂更明显，但对血浆粘度无影响；两种剂型均能增加正常大鼠6小时尿量，说明其有改善血瘀动物血液流变学作用及利尿作用，这些药理作用与其通腑降浊、活血化瘀功能相符。4、毒理学研究方面 急性毒性试验采用小鼠灌胃给药及大鼠灌胃给药，7天内全部小鼠存活，无中毒症状，表明尿毒清对大、小鼠基本无毒；长期毒性试验连续灌胃6个月后进行血液流变学指标10项、血液生化指标10项和病理学检查，结果给药组与对照组大鼠间的血象，血液生化指标除在24周大剂量组的TG水平降低与正常对照组有差异外，其它均无显著差异且都在正常范围内。病理学检查未见与药物有关的损害，表明大鼠ig尿毒清片相当推荐临床剂量75倍，连续6个月未显示明显的药物性毒性反应。该课题技术特点、创新点主要体现在：1、根据中医对CRF病机的认识及中医中药治疗CRF的特色及优势，研制了尿毒清颗粒剂及片剂，国内首创了纯中药制剂治疗CRF，填补了中成药治疗CRF的空白。2、改良了腺嘌呤CRF模型，采用小剂量腺嘌呤(0.5%，国外报道为0.75%)，以延长造模时间，更有利于CRF的药效观察，达到了CRF模型病理过程的长期相对稳定的要求；首次采用了电凝摘除小鼠肾脏的CRF模型(以往国内外用大鼠作实验动物)。建立了一套适合中药对CRF药效评价方法。3、尿毒清片剂采用了高效率的CO_2-SFE提取和吸附澄清工艺等先进的技术和方法，使该产品在制备工艺和质量标准等方面超过了同类产品水平，对中药制剂的再次开发具有示范作用。4、“尿毒清”产品作为医院制剂应用十一年，投放市场近八年来，有关临床疗效统计资料表明其疗效确切，使用安全，无不良反应。据检索相关临床观察报道40余篇，对其疗效和安全性也作了充分肯定，至今未见毒副作用的报导，从而说明了“尿毒清”疗效确切、使用安全。 CRF属西医西药缺乏肯定疗效的疑难病之一，目前国内外多用透析和肾脏移植虽可延长终末期尿毒症病人的生命，但至今仍然存在许多难以解决的并发症，且费用高昂。尿毒清颗粒剂用于CRF患者，临床证明改善症状迅速，稳定肾功能确切，患者生活质量显著提高，Ⅱ期临床试验的总有效率达到69.33%。该产品自1996年投放市场以来，以其确切的疗效，使用安全，副作用小的特点，受到广大医务人员和患者的欢迎。尿毒清颗粒已获国家新药证书和生产批文，具有了自己的知识产权和独家生产权，2000年列为国家二级中药保护品种及申请了专利保护。