[01731331]人和动物结核病新型特异诊断试剂研究

结核病是主要由结核分枝杆菌与牛分枝杆菌引起的、人兽共患传染病。传统结核检测方法检出率低，生物安全风险大，或受环境分枝杆菌干扰，费时费力，不适合于野生动物。为此，向武汉市科技局申请项目并获得资助（20066002056）。课题结束后，国家“十一五”科技支撑计划项目 (2006BAD04A05)、农业公益性行业科研专项（200803018)和现代肉牛产业技术体系专项经费等分别给予了部分资助。　　该研究旨在研发灵敏、特异、简便、快速的新型人与动物结核诊断方法，为人与动物结核病的早期、准确、快速诊断提供技术支撑。　　项目针对结核分杆菌特异性蛋白诱导的细胞与体液免疫反应，自主研发了牛与梅花鹿结核快速检测试纸条，牛、人与梅花鹿结核ELISA试剂盒，和牛、人、梅花鹿结核IFN-γ检测试剂盒。　　（1）将MPB70/MPB83/ESAT6/CFP10四种蛋白融合作为检测抗原，研制了抗体检测ELISA试剂盒。　　（2）研制了牛结核MPB83/ MPB70抗体检测试纸条。　　（3）采用ESAT-6、CFP-10和RV3872融合蛋白为刺激源，建立了人、牛与梅花鹿IFN-γ夹心ELISA，并应用于结核的检测。　　该成果的主要创见是：　　（1）通过克隆与融合表达多种结核分支杆菌多抗原，筛选鉴定特异性诊断抗原；　　（2）通过筛选鉴定高亲合力单克隆抗体，建立灵敏特异的IFN-γ结核病释放检测法。　　科技查新表明，国内外均未见采用CFP-10/ESAT-6/Rv3872作为刺激抗源的人、牛、梅花鹿结核IFN-γ检测方法，MPB70/MPB83/ESAT6/CFP10四蛋白融合抗原抗体ELISA，MPB70/MPB83抗体检测胶体金试纸条诊断技术的研究报道。因此，该成果达到国际先进水平。　　该成果涉及的产品处于中试阶段，尚不能转化与应用。　　存在问题：产品规模化生产工艺与成熟转化还需进一步研究。