[01626151]肝纤溶颗粒抑制细胞外基质(ECM)合成的抗肝纤维化作用

1 实验研究1制备工艺的研究：结果表明，该制备工艺稳定﹑可行。　　2质量标准的研究：　　（1）鉴别：根据本制剂处方组成及生产工艺对方中丹参﹑黄芪进行了薄层定性鉴别。　　（2）检查：按中国药典2000年版IC颗粒剂项下有关规定进行了粒度﹑水分﹑溶化性﹑装量差异，微生物限度检查，另外有检查重金属及砷盐含量。　　（3）含量测定：本制剂中丹参为君药，故对其进行了含量测定。结果规定样品丹参中丹参酮Ⅱ2的含量为每克不低于0.07mg。　　3 初步稳定性试验：按本品质量标准及2000年版一部附录IC颗粒剂项下有关规定，对制剂的性状、鉴别、粒度、水分、溶化性、含量测定、微生物限度进行全面考察，试验结果表明，各项均符合要求，表明该制剂在考察期内（三个月）基本稳定。　　4 药学实验研究　　(1) 肝纤溶颗粒对肝纤维化动物模型细胞外基质（ECM）合成的影响，结果表明肝纤溶颗粒对肝纤维化模型大鼠血清LN﹑HA﹑PC-Ⅲ升高有明显的抑制作用其机理可能与抑制肝损伤时星状细胞的过度增生有关。详细机理有待进一步研究。　　(2)肝纤溶颗粒对四氯化碳损伤大鼠模型体重的影响，实验结果表明肝纤溶高剂量组（经造模处理，实验开始第三周起灌服33.3%肝纤溶颗粒1.5ml/kg体重，日一次，连续6周）﹑肝纤溶中剂量组（经造模处理，实验开始第三周起灌服25%肝纤溶颗粒1.5ml/kg体重，日一次，连续6周）说明两组药物对大鼠体重影响不大。　　(3)肝纤溶颗粒对四氯化碳损伤大鼠模型肝功能的影响，实验结果表明：肝纤溶颗粒高﹑中剂量组对四氯化炭所致实验性肝损伤大鼠的肝功能有明显的改善作用。 　　(4)肝纤溶颗粒对四氯化碳损伤大鼠模型肝组织病理学及血清中透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、血清Ⅳ型胶原的影响，实验结果表明：说明肝纤溶颗粒高﹑中剂量组对四氯化炭所致实验性肝损伤大鼠有明显的保护作用，有良好的抗肝纤维化的作用。　　(5)肝纤溶颗粒对四氯化碳损伤大鼠模型超氧化物歧化酶（SOD）的影响，实验结果表明：肝纤溶颗粒中﹑低剂量组能明显提高四氯化炭所致实验性肝损伤大鼠的SOD，提示肝纤溶颗粒具有保护肝细胞免受损伤以及抗肝纤维化的作用。　　(6)肝纤溶颗粒对四氯化碳损伤大鼠模型丙二醛（MDA）的影响，实验结果表明：肝纤溶颗粒中﹑低剂量组能降低四氯化炭所致实验性肝损伤大鼠MDA的含量，有保护肝细胞，预防和阻断肝纤维化发展的作用。　　(7)肝纤溶颗粒对四氯化碳损伤大鼠模型单氨氧化酶（MAO）的影响，实验结果表明：肝纤溶颗粒高﹑中剂量组能明显降低四氯化炭所致实验性肝损伤大鼠MAO的含量，具有极明显的的抗肝纤维化的作用。　　(8)肝纤溶颗粒对四氯化碳损伤大鼠模型羟脯氨酸的影响，实验结果表明：肝纤溶颗粒高﹑中剂量组能降低四氯化炭所致实验性肝损伤大鼠羟脯氨酸的含量，有明显的的抗肝纤维化的作用。　　2 临床观察 临床观察结果显示：治疗组为30例，总有效率为86.67%，其中显效14例（46.67%），有效12例（40%），无效4例（13.33%）。对照组为30例，总有效率为73.33%，其中显效率（20%），有效16例（53.33%），无效8例（26.67%）。两组显效率及总有效率有显著性差异（P＜0.05），说明治疗组疗效优于对照组。表明肝纤溶颗粒有明显的抗肝纤维化，保护肝细胞的作用。肝纤维化(HF)是慢性肝病的重要病理改变，并贯穿于慢性肝病的发展过程，是一切慢性肝病向肝硬化发展的必经阶段也是最终可以逆转的阶段。慢性肝病绝大多数有肝纤维化，其中25%～40%最终发展为肝硬化乃至肝癌，阻断乃至逆转肝纤维化以成为慢性肝病治疗中的一个关键性问题]。　　目前，国内外抗肝纤维化治疗主要包括　　(1)彻底治疗原发病，对于病毒性肝炎进行抗病毒治疗，日本血吸虫肝纤维化进行彻底的杀虫治疗，早期治疗可逆转或终止肝纤维化发展，但晚期不能。酒精性或中毒性肝纤维化，终止饮酒及毒物进入体内，可促进肝纤维化好转；　　（2）抗肝纤维化治疗；　　（3）免疫调控治疗；　　（4）对症及支持疗法。　　抗肝纤维化的药物治疗研究，国外实验室治疗研究报道较多，国内临床研究较多。国内外研究结果表明，IFN-r可以抑制成纤维细胞胶原的合成，其作用部位发生在前胶原mRNA的转录水平。肿瘤坏死因子α(TNFα)主要由单核巨噬细胞产生，生物学作用包括抗肿瘤，参与免疫调节和机体代谢。有学者报告汉防己甲素可抑制体外培养大鼠的肝细胞，Ito细胞DNA和胶原合成，抑制程度与浓度作用均成正相关。TFN-α在鼠血吸虫肝纤维化模型中，可减少结缔组织沉积。INF-r能激活PBMCs和肝Kupffer细胞，产生TNFα，还可减少胶原mRNA水平，抑制肝内纤维的产生。国内外对中草药抗肝纤维化方面做了大量的实验和临床研究工作。说明中医在整体观念原则指导下通过辨证论治治疗肝纤维化有着明显的优势。　　该课题取“活血化瘀，益气软坚”之法，筛选有效药物，最佳合理组成，制肝纤溶颗粒。实验结果表明该制剂对肝脏细胞具有明显的保护及抗肝纤维化作用。临床观察无任何不良反应的发生，且疗效明显，是治疗肝纤维化极具研究价值和开发前景的中药制剂。有其广泛的推广应用价值，渴望获得可观的社会效益和经济效益。