[01592981]真苏发酵发生产EPA、DHA和GIA的研究

EPA、DHA和GLA是十分重要的多不饱和脂肪酸，有多种生理功能。用真菌发酵这些多不饱和脂肪酸是国际上研究热之一。在江苏省青年基金的资助下，该课题组通过大量筛选工作，共获得10株产多不饱和脂肪酸的菌株。其中发现轮梗霉属及小克银汉霉属产生EPA和头孢属产生DHA属国内外首次报道。轮梗发酵产EPA可达253.7mg/L，同时伴生花生四烯酸(AA)达549.8mg/L。头孢霉发酵产DHA可达63.4L，伴生的α-亚麻酸(ALA)达121.4mg/L。发酵产量为当时国内领先水平，达到国际先进水平。研究发现菌种储藏温度、时间和是否活化对发酵产多不饱和脂肪酸有极大的影响。首次发现菌种在发酵前进行转接活化及用饱子接种对获得高含量的多不饱和脂肪酸十分重要。首次报道低pH、弱光照等培养条件也有利于诱导菌丝发酵生产多不饱和脂肪酸。提出了先进大量大生物量积累，再进行多不饱和脂肪酸诱导转化的两段培养法。发现了头孢霉菌丝发酵时存在局部16：1至18：1的补充途径，可用18：3(α-)/18：2和∑C18/∑C16作为考察亚油酸向α-亚麻酸的转化及十六碳向十分碳延长的指标，人为改变这两个指标或创造有利于这两步反应的条件将有利于获得高产量EPA和DHA。建立了苏丹Ⅱ+苏丹Ⅳ混合染色菌丝快速半定量地鉴定菌丝油脂含量的方法，有效地解决了大通量的多不饱和脂肪酸高产菌株的初筛工作。根据前述的接种前的菌种活化与孢子接种和培养过程中的诱导转化有利于多不饱和脂肪酸积累的研究成果，发明了一种新的发酵生产工艺，利用筛选到的产GLA的根霉和毛霉菌种，生产出富含GLA的酒酿和米酒，GLA占总脂肪酸含量在5%以上，占总干物质0.05%左右，有广阔的市场前景，已多家公司与课题组商谈技术转让合作生产事宜。以上研究成果，共发表了13篇研究论文，其中一级学报5篇、其它核心期刊4篇，申请了“一种富含γ-亚麻酸的酒酿和米酒的生产工艺”的发明专利。