[01585489]将几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因导入月季创建广谱抗病新种质
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种植
类型:
非专利
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技术详细介绍
该项目执行年限一年,系“将几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因导入月季创建广谱抗病新种质“的初步研究。该项目主要进行了月季离体培养遗传转化系统建立、目的基因(几丁质酶基因、β-1,3-葡聚糖酶基因)获取及植物表达载体构建等方面的研究。在该项目研究中,选以“Samantha“月季的嫩梢等为外植体,经过丛生芽的诱导及其不定根的再生,建立了“Samantha“的离体培养再生体系。以改良的CTAB法,分别从菜豆、豇豆和大豆叶片中提取了基因组DNA。根据本研究室前期工作研究结果以及参照文献报告,设计了PCR特异引物,优化了PCR反应体系、条件,成功扩增出了特异的菜豆几丁质酶信号肽基因、豇豆几丁质酶成熟蛋白编码基因及大豆β-1,3-葡聚糖酶基因。经过拼接重组,最终获得了完整的、抗真菌活性强的几丁质酶编码基因和β-1,3-葡聚糖酶基因,并成功构建了植物表达载体,为将几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因导入月季创建广谱抗病新种质打下了坚实的基础。
该项目执行年限一年,系“将几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因导入月季创建广谱抗病新种质“的初步研究。该项目主要进行了月季离体培养遗传转化系统建立、目的基因(几丁质酶基因、β-1,3-葡聚糖酶基因)获取及植物表达载体构建等方面的研究。在该项目研究中,选以“Samantha“月季的嫩梢等为外植体,经过丛生芽的诱导及其不定根的再生,建立了“Samantha“的离体培养再生体系。以改良的CTAB法,分别从菜豆、豇豆和大豆叶片中提取了基因组DNA。根据本研究室前期工作研究结果以及参照文献报告,设计了PCR特异引物,优化了PCR反应体系、条件,成功扩增出了特异的菜豆几丁质酶信号肽基因、豇豆几丁质酶成熟蛋白编码基因及大豆β-1,3-葡聚糖酶基因。经过拼接重组,最终获得了完整的、抗真菌活性强的几丁质酶编码基因和β-1,3-葡聚糖酶基因,并成功构建了植物表达载体,为将几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因导入月季创建广谱抗病新种质打下了坚实的基础。