本发明涉及真菌的发酵培养基及工艺。更具体地,本发明涉及一种绿僵菌发酵生产脂肪酶的培养基及方法。,所述培养基的原料配方为:橄榄油0.25-2w%,蛋白胨0.05-0.4w%,ZnCl20.0125-0.1mol/L,叶酸0.005-0.04w%,pH5.0-6.5,其余为水。该方法通过将发酵种子液接种于培养基,100mL的三角瓶装液量为50mL,接种量10%,于25℃,转速150r/min下培养。本发明的发酵方法有发酵周期短;条件温和,易于控制;提供的用于绿僵菌发酵生产脂肪酶的培养基,具有脂肪酶产率高,脂肪酶活力高等优点。