[01409227]复方益母草流浸膏半仿生提取法研究模式

技术说明：该课题复方益母草膏为例，探讨中药复方用半仿生（SBE）的研究方法。首先用正交设计，以藁本内酯、挥发油、萃取物为指标成分，优选当归挥发油的超临界流体萃取（SFE）工艺条件；然后用正交设计，以阿魏酸、梓醇、水苏碱、总多糖、醇浸出物、干浸膏为指标成分，分别优选非挥发性药效物质的SBE、水提取（WE）、乙醇提取（EE）的工艺条件；最后分别以化学成分指标、药理效应指标、血清HPLC指纹图谱对3种方法的提取液进行比较，综合评判3种提取方法的优劣，确定最优工艺。结果显示：GC－MS检出的SFE萃取物与水蒸气蒸馏提取挥发油的主要成分基本相同，挥发油、藁本内酯的提取率分别为水蒸气蒸馏法的1.56倍、1.71倍；优选出的SFE工艺条件为：当归粉碎成过4目筛，在30MPa、65℃条件下萃取2h，分离Ⅰ条件：12MPa、40℃，分离Ⅱ条件：6MPa、30℃，验证试验结果表明SFE工艺条件稳定可行。SBE液的6种指标成分的综合评分值最高，对抗缩宫素致大鼠离体子宫平滑肌强烈收缩、缓解垂体后叶素诱发兔在体子宫平滑肌痉挛、抑制催产素致大鼠“痛性痉挛”、活血等药理作用最强；SBE液、WE液、EE液给药后2h血清的共有峰重叠率、相似度差异较小，LC－MS检测出的10个特征峰的分子量相同，SBE液、WE液给药后5h血清的特征峰数量未发现变化，但EE液的特征峰明显减少。综合评判结果：SBE工艺优于WE工艺、EE工艺，复方益母草膏的非挥发性药效物质以用SBE工艺条件提取为佳，即药材粉碎成过4目筛的粗粉，分别加20%乙醇提取3次，溶剂用量依次为10、8、8倍，pH值依次为3.50、7.50、8.50，提取时间依次为1.5、1.0、1.0h；验证试验结果表明SBE工艺条件稳定可行。该研究将化学成分指标、药效指标、血清指纹图谱有机的结合起来进行SBE工艺研究，既优选工艺条件，又优选工艺路线。因此，“SBE法”既符合中医药本原理论，又能充分融合现代科学技术手段，是对中药提取思路与方法的拓展和创新，该课题进一步丰富和完善了中药复方用SBE法提取的研究设计思路与方法。应用前景：“半仿生提取法”是口服中药制剂的提取新技术。该项技术是利用“灰思维方式”，将整体药物研究法与分子药物研究法相结合，从生物药剂学的角度为经消化道给药的中药及其复方创立的一种提取新技术。它模拟口服给药及药物经胃肠运转的过程，适合工业化生产，体现中医治病综合成分作用的特点，有利于用单体成分控制制剂质量。这一方法的提出，迈出了向思维方式转换的关键的第一步，带来了中药制剂工艺的革新。它开拓了既符合中医药理论，又能体现现代科学技术水平的提取方法的先河，对加速中药现代化的进程，医学模式的转换都会起到很大的推动作用。