[00131240]人谷胱甘碱肽-S-转移酶Pi的纯化方法及该酶的应用
交易价格：
面议
所属行业：
生物化工
类型：
发明专利
技术成熟度：
正在研发
专利所属地：中国
专利号：200610040269.8
交易方式：
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联系人：
南京师范大学
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所在地：江苏南京市
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对所交付的所有资料进行保密
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技术详细介绍
本发明公开了一种人谷胱甘碱肽-S-转移酶Pi的纯化方法，其步骤为：（1）将含表达载体pET-28a/hGSTpi的21/DE3菌株接种于LB固体培养基，振荡培养，离收集菌体；（2）按每g菌体沉淀加入PH7.9的结合缓冲液重悬收集菌体沉淀，经超声破碎、离心后取上清液，用缓冲液洗脱；（3）将洗脱上清用透析液1透析去咪唑，再用透析液2透析测定酶活性；（4）用PBS缓冲液透析，用凝血酶水解切割His6标签，获得人俗胱甘肽-S-转移酶hGSTpi。本发明方法纯化得到的hGSTpi重组蛋白纯度高，且空气氧化形成的无活性二聚体少，hGSTpi在炎证治疗中的应用，不仅能有效控制炎症，而且对机体免疫系统的影响小，副作用极小。
本发明公开了一种人谷胱甘碱肽-S-转移酶Pi的纯化方法，其步骤为：（1）将含表达载体pET-28a/hGSTpi的21/DE3菌株接种于LB固体培养基，振荡培养，离收集菌体；（2）按每g菌体沉淀加入PH7.9的结合缓冲液重悬收集菌体沉淀，经超声破碎、离心后取上清液，用缓冲液洗脱；（3）将洗脱上清用透析液1透析去咪唑，再用透析液2透析测定酶活性；（4）用PBS缓冲液透析，用凝血酶水解切割His6标签，获得人俗胱甘肽-S-转移酶hGSTpi。本发明方法纯化得到的hGSTpi重组蛋白纯度高，且空气氧化形成的无活性二聚体少，hGSTpi在炎证治疗中的应用，不仅能有效控制炎症，而且对机体免疫系统的影响小，副作用极小。
