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选择易培养、高生物量、廉价的普通海洋小球藻(Chlorella vulgaris)作为生物制取类金属硫蛋白的藻类资源,在60μmol/L锌的诱导下,每克湿藻可获得类金属硫蛋白2.0毫克。
实验对锌诱导小球藻制取类金属硫蛋白(Zn-MT-like)的方法和工艺参数进行探讨及优化,在此条件下,由小球藻锌诱导制取的类金属硫蛋白(Zn-MT-like)的纯度可达到60%(粗品)和90%(精品)以上。
利用反相色谱与电喷雾电离质谱联用的方法、紫外光谱法和红外光谱及氨基酸组成等方法对小球藻Zn-MT-like进行表征,发现其结构与兔肝金属硫蛋白(Zn-MTs)有一定的相似性。
对小球藻Zn-MT-like的抗氧化活性和抗菌活性测试表明,Zn-MT-like对羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基均具有极强的清除作用,其抗氧化能力甚至高于兔肝金属硫蛋白(Zn-MTs);小球藻Zn-MT-like对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌)、霉菌(青霉、曲霉)均表现出较强的抗菌活性。
此外,小球藻Zn-MT-like的体外金属重组试验结果表明,脱金属的小球藻Zn-MT-like(即apo-MT-like)可与Cu或Se进行体外金属结合重组的特点,尤其是Se易与apo-MT-like结合,重组形成硒结合的类金属硫蛋白(Se-MT-like)。
由于MT-like制取的原材料丰富、易得,生产成本低廉,且MT-like具有与哺乳动物MTs相似的生物活性。因此,由小球藻诱导制取的类金属硫蛋白(Zn-MT-like)具有较高的开发价值,并将在功能食品、化妆品及医药领域有广阔的应用前景,此项研究结果在国内外尚未见有报道。