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本课题来自国家自然科学基金项目,通过对甘肃野生与栽培乌拉尔甘草内生菌代谢产物药效学及有效内生菌代谢产物的化学成分研究,揭示甘草内生菌代谢产物与宿主植物在药效及化学成分方面的关联,为甘草内生菌代谢产物作为微生物资源应用提供依据。
对野生与栽培乌拉尔甘草内生菌分离纯化,体外抑菌实验筛选有效菌株,鉴定菌种,利用紫外分光光度法和高效液相色谱法将具有体外抑菌的有效菌株与甘草黄酮类、皂苷类成分对比分析。
提取野生与栽培甘草中的总黄酮和总皂苷类成分,优选提取工艺,并经体外抑菌评价活性。
进行上述有效菌株代谢产物、甘草药效成分与甘草水煎液体内抑菌、抗炎、止咳化痰等药效学研究。
对具有上述活性的有效菌株代谢产物与甘草活性成分进行成分分析比较。
最终分离出140株内生菌,其中野生63株,栽培77株。
总黄酮、总皂苷及筛选的20株内生菌有效菌株发酵物均具有不同程度体外抑菌作用。
10株(JTYB029、JTZB002、JTZB005、JTZB006、JTZB014、JTZB020、JTZB043、JTZB058、JTZB060、JTZB063)体内对金黄色葡萄球菌或肺炎链球菌有抑菌活性。
7株(JTYB006、JTYB029、JTYF023、JTZB005、JTZB006、JTZB060、JTZB063)有体内外抗炎活性。
6株(JTYB029、JTZB005、JTZB006、JTZB043、JTZB060、JTZB063)有止咳活性。
5株(JTYB029、JTZB005、JTZB006、JTZB058、JTZB063)有祛痰活性,且甘草内生菌发酵物活性分别优于或等同于甘草总皂苷、总黄酮、水煎液以上有效菌株发酵物粉末中总黄酮含量1.13~2.24mg·g-1,总皂苷含量50.01~71.93mg·g-1,甘草酸铵含量0.012~0.074mg·g-1,甘草苷含量0.01~0.06mg·g-1,甘草素含量0.003~0.027mg·g-1。
初步推测总黄酮、总皂苷是甘草内生菌抑菌和抗炎作用的有效部位,但甘草内生菌代谢产物中可能还存在其他未知有效部位,且代谢产物的总黄酮、总皂苷中还含有其他具有抑菌、抗炎作用的活性成分,有待进一步研究。
本课题初步验证了甘草内生菌代谢产物抑菌、抗炎、止咳化痰药理活性,初步明确甘草内生菌代谢产物含有与宿主植物甘草相同的药效物质基础,为今后药用植物内生菌研究提供借鉴。