[01240294]梨多酚氧化酶基因的克隆及其转化研究
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以鸭梨果皮基因组DNA为模板，克隆到的鸭梨多酚氧化酶基因的蛋白编码区含有1782个核苷酸，将该基因转入大肠杆菌，能够表达一个分子量约66kDa的蛋白，用BamHI和PvuII双酶切中间载体pGEM-T-PPO，获得了含PPO基因的3′端430bp的DNA片段，将此基因片段反向插入构建了PPO基因植物双元反义表达载体pBI121-PPO，通过电击法转化土壤根癌农杆菌。通过农杆菌介导的果树遗传转化和离体叶片再生，获得再生的幼芽，确定了农杆菌侵染过程中的各种重要参数。该研究对控制果实加工、作物栽培、组织培养中的褐变现象在理论和实践上具有指导意义。