[01234375]生产转基因山羊的piggyBac转座子载体构建方法及其应用
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技术详细介绍
本发明公开了一种能用于生产转基因羊的piggyBac转座子载体的构建方法,主要步骤包括：合成一段包含piggyBac转座子发生转座所必需的PB5’端和PB3’端碱基序列,合成时在PB5’端和PB3’端中间预留出多克隆位点,然后将该序列克隆到pBluSKm载体中构建成pBluSKm-PB载体;再将Neomycin抗性基因和绿色荧光蛋白基因克隆到pBluSKm-PB载体中最终构建成pBluSKm-PB-NEO-EGFP转座子载体。本发明所获得的转座子载体能够满足细胞筛选、倒置荧光显微镜下显微操作和生产转基因羊等要求。